Применение лазерной флуориметрии для определения влияния единичной аминокислотной замены на индивидуальные фотофизические параметры флуоресцирующей формы флуоресцентного белка mRFP1

Определены индивидуальные фотофизические параметры хромофора флуоресцирующей формы флуоресцентного белка mRFP1 и двух его мутантов (аминокислотная замена по положению 66 — белки mRFP1/Q66C и mRFP1/Q66S). Для этого, наряду с традиционными методами флуориметрии и спектрофотометрии, использовался метод нелинейной лазерной флуориметрии. Показано, что значение индивидуального коэффициента экстинкции хромофора белков коррелирует (коэффициент корреляции более 0.9) с объемом заменяемого аминокислотного остатка по положению 66 (аналогично положениям максимумов поглощения, возбуждения и эмиссии флуоресценции).